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固相萃取、用冠醚衍生化、以及质谱、方法、试剂和试剂盒与流程

作者:NG体育 发布时间:2024-06-07 09:13:36 次浏览

优先权
本申请依据35u.s.c.§119要求优先权,并且有权要求于2015年03月28日提交的美国临时申请系列第62/139,692号的权益,其内容通过引用全文纳入本文。
介绍
需要获得快速、精简且自动检测特定分析物的方法。在医学环境中,这样的方法将促进分析物的检测,诸如药物、激素、信号剂(signalingagents)和氨基酸。在农业和公众健康的情况下,抗生素、杀虫剂或其它污染物的残留水平的检测融入了我们食用食物和饮用水的安全性中。此外,近来食品标签标准的变化,例如“无激素”或“有机”,导致了农业领域中简化测试的需要。
在许多情况下,经由放射免疫分析(ria)来对特定分析物进行临床定量。近年来,由于质谱领域的技术进步,测试平台从ria逐渐转移至液相色谱质谱(lcms)。通常,基于lcms的分析可提供快速、灵敏、分析物特异性读数,这些是ria分析可能缺少的。然而,由于多种原因,特定分析物可能难以检测。例如,某些分析物难以测定,因为它们易于氧化并降解。此外,特定分析物定量的现有技术通常涉及萃取回收率不稳定的复杂且繁琐的萃取工艺。例如,不稳定的萃取回收率导致结果往往是不可靠的,并且具有高的定量下限(lloq);例如lloq在>10ng/ml的范围内。而且,现有的萃取工艺不能提供用于衍生化的可靠样品。
药物包括非法药物和合法药物、及其代谢物或衍生物。检测这些化合物对于法庭或处方依从性是非常重要的。此外,这些药物可能在体液中不稳定,因此检测可能是困难的。在任何情况下,非常需要一种完全自动化和简化的检测/定量方法,该方法能使人为介入或误差的空间最小化。
技术实现要素:
本发明文件提供了能够用于测试可单酰化、含单胺、或含单酚的分析物水平的材料和方法。例如,感兴趣的分析物包括:在生物样品中的神经递质、激素、雌激素(雌酮、雌二醇、雌三醇)、大麻素如△-9-四氢大麻酚(thc)和hu210、5-羟色胺、氨基酸、bpa以及生物样品中许多其它含伯胺的分子、或者含酚的分子。
本发明文件还提供了能够用于测定含顺式二烯的分析物(如维生素d)、其类似物以及代谢物(例如,25-ohd3、25-ohd2、24,25-(oh)2d3、1,25-(oh)2d3、1,25-(oh)2d2)的材料和方法。
本发明文件还提供了能够用于衍生并测试含有酮、或醛的分析物(例如、睾酮、孕酮、皮质酮、和许多类固醇激素)的材料和方法。
所需分析物可以通过质谱(包括串联质谱技术)选择性地、灵敏地检测和测量。如本文所述,整个定量过程包括样品制备过程,所述样品制备过程采用固相萃取以捕获分析物,然后进行分析物的化学衍生化,然后通过lc-ms/ms技术定量。
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