瑞禧分享星型纳米金粒子FAM-AuNPs-cDNA/PE-AuNRs标记荧光染料
纳米金具有众多形态,包括球型,也就是狭义上的金纳米粒子,星型、棒型、笼型等,今天NG体育小编分享一种星型的纳米金粒子标记荧光素,一起看看吧:
将合成的AuNPs 以10000 r/min离心15 min,弃去上清液,将沉淀物重悬于4.5 mL 10 mmol/L磷酸盐缓冲溶液( PBS, pH 8.0,含0.01%十二烷基硫酸钠(SDS))。将10 uL500 mmol/L醋酸缓冲溶液( pH 5.2)、20 uL 10 mmol/L TCEP(现配现用)和100 u.L 100 umol/L cDNA混合均匀,在室温下孵育1 h,然后与AuNPs溶液混合,室温下避光孵育过夜。
向上述反应溶液中加入50 uL 10 mmol/L PBS ( pH 8.0,0.01% SDS, 100 mmol/L NaCl) ,在室温下孵育30 min,使cDNA与AuNPs复合。5000 r/min离心10 min,去除多余的cDNA。将cDNA-AuNPs复合物重悬于10 mmol/L PBS( pH 8.0)中,使cDNA-AuNPs复合物终浓度为500 nmolL。在500 uL上述复合溶液中,加入 10 uL 40 umol/L ICP-Aptamer 和 10 uL 10 mmol/LPBS( pH 8.0 ,50 mmol/L NaCl ,10 mmol/L KCI,10 mol/L MgCl, ,50 mmol/L Tris) , 60℃温育10 min,冷却至室温,即到荧光探针溶液的动态平衡。
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