L-DOX的制备及F-DOX/T-DOX的分离提取实验简述
作者:NG体育 发布时间:2024-11-25 09:11:27
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L-DOX的制备:L-DOX的脂质组成为HSPC/胆固醇/DSPE-PEG2000(11:8:1mol/mol)。阿霉素脂质体是通过远程加载制备的,它由跨膜硫酸铵梯度驱动。脂质体中DOX的浓度为2 mg/mL。采用Sephadex G50尺寸排除柱测定DOX脂质体的封装效率。采用UPLC-MS/MS系统分析DOX的浓度。DOX和内标(IS)(柔红霉素)检测为带电离子。F-DOX和T-DOX的分离和提取:采用Oasis HLB柱,采用SPE方法从E-DOX中分离血浆中的F-DOX。在没有真空的情况下,装载离子体样品。然后用水清洗HLB柱,然后用乙酸的甲醇洗脱,以洗脱吸附在HLB柱上的F-DOX。洗脱后的溶液用氮气干燥,残渣用初始流动相重悬。采用液-液萃取(LLE)提取血浆中的T-DOX硼酸盐缓冲液加入样品,用氯仿提取,然后浓缩。有机层用氮气干燥,用初始流动相重组。F-DOX、T-DOX和IS的色谱图(A)不添加DOX和IS的空白血浆样品;(B)LLOQ样品;(C)静脉注射后采集的真实血浆样本。