UVA光处理对照组钙蛋白阳性细胞数量略有增加,而空脂质体和cRGD脂质体+UVA处理组钙蛋白阳性细胞数量分别增加。然而用2Cl、3£lipo2Cl和3£cRGD-lipo2Cl处理时,细胞钙网蛋白的分布存在差异(如图)。结果显示,3×cRGD-lipo2Cl处理与通透细胞几乎相同(图a)。产生的荧光影像学分析进一步证实了UVA激活后3£cRGD-lipo2Cl处理中钙网蛋白蛋白的细胞内阳性染色(图b)。结果表明,在2Cl和3×lipo2Cl处理下,细胞内钙蛋白水平越来越高,3×cRGD-lipo2Cl检测(图a)。对于H22细胞,与对照组相比,单独处理800 nM的2Cl化合物和300 nM的脂质体2Cl的细胞群分布有一致的不同(图c)。
H22细胞与MCF- 7细胞的主要区别在于,通透细胞钙蛋白的荧光强度远弱于非通透细胞钙蛋白(图c)。然而,3×cRGD-lipo2Cl在所有2Cl处理中仍然接近于渗透信号。此外,荧光成像分析也证实了3×cRGD-lipo2Cl对H22中钙网蛋白的细胞内染色(图d)。所有结果表明,cRGD靶向脂质体独特并促进了免疫原性细胞死亡标记物ATP和HMGB1的细胞外释放,以及低浓度2Cl化合物激活后细胞内钙蛋白标记物的检测。
长波紫外线激活后 cRGD 靶脂质体2Cl 检测钙网蛋白(CRT)。
(a)与 MCF-7细胞中的其他脂质体溶液和对照相比,cRGD 靶脂质体2Cl 处理后2小时 CRT 阳性细胞的分布加上 UVA 光激活的流式细胞术分析;
(b)细胞 CRT 的荧光成像分析:3cRGD-lipo 2Cl (1.00 mM)和在 MCF-7细胞中2小时的 UVA 激活;
(c)-(d)类似的流式细胞术和 H22细胞中 CRT 的荧光成像分析。