DOPE/CHOL/OA(4:4:3)酸敏脂质体的制备 (分享)
作者:NG体育 发布时间:2022-08-10 16:10:52
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DOPE/CHOL/OA(4:4:3)酸敏脂质体的制备
制备组成分别为DOPE/Chol/OA(4:4:3)的酸敏脂质体及DOPC/Chol/OA(4:4:3)脂质体,用于包裹质粒pSV_2-neo,pUC18-ras,pSV-neo-ras及大分子线状DNA,包裹率可达50%.被脂质体包裹的DNA不被DNase降解,提示DNA分子被脂质体包裹在微球体内部.
电泳检测表明,被包裹的DNA分子没有断裂.所得到的脂质体较稳定,4℃放置5~6月,脂质体内仍保留部分DNA分子.
制备酸敏脂质体时,pH为8.0时脂质体较稳定,pH<6.5~7时则不稳定.
脂质体的质量控制
1、形态、粒径及其分布
采用扫描电镜、激光散射法或激光扫描法测定。根据给药途径不同要求其粒径不同。
如注射给药脂质体的粒径应小于200nm,且分布均匀,呈正态性,跨距宜小。
2、包封率和载药量
包封率:包封率=(脂质体中包封的**/脂质体中**总量)×*
一般采用葡聚糖凝胶、超速离心法、透析法等分离方法将溶液中游离**和脂质体分离,分别测定,计算包封率。通常要求脂质体的**包封率达80%以上。
载药量:载药量=[脂质体中**量/(脂质体中**+载体总量)]×*
载药量的大小直接影响到**的剂量,故载药量愈大,愈易满足临床需要。载药量与**的性质有关,通常亲脂性**或亲水性**较易制成脂质体。
3、脂质体的稳定性
1)、物理稳定性:主要用渗漏率表示。
渗漏率=(放置前介质中**量-放置后介质中的药量)/制剂中药量x*
胆固醇可以加固脂质双分子层膜,降低膜流动,可减小渗漏率。
2)、化学稳定性:
(1)磷脂氧化指数:氧化指数=A233nm/A215nm;一般规定磷脂氧化指数应小于0.2。
(2)磷脂量的测定:基于每个磷脂分子中仅含1个磷原子,采用化学法将样品中磷脂转变为无机磷后测定磷摩尔量(或重量),即可推出磷脂量。
4、防止氧化的措施:
防止氧化的一般措施有充入氮气,添加抗氧剂-生育酚、金属络合剂等;也可直接采用氢化饱和磷脂。
5、脂质体的*:
*的一般方法有过滤*、无菌操作、-射线照射(60钴15~20kGy)、121℃热压*等。
提供的产品种类包括:合成磷脂、糖化学,石墨炔(graphyne)多肽、PEG衍生物、嵌段共聚物、胆固醇修饰产品、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、超分子、静电纺丝纤维膜、近红外荧光染料、MAX相陶瓷、发光材料、光电材料、石墨烯、金属配合物发光材料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、钙钛矿、光电材料、小分子PEG衍生物、点击化学、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等.
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