UDP糖|拟薄角藻副浆和其他碳水化合物的代谢:动力学表征，结构和细胞定位的葡萄糖焦磷酸化酶
作者： 发布时间：2022-08-08 09:54:14
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许多寡聚物和多糖(包括paramylon)在浒苔虫的生命周期中至关重要，它们是由糖基转移酶以udp -葡萄糖为底物合成的。
在此，我们报道了一种拟在gracilis中编码udp -葡萄糖焦磷酸化酶(EgrUDP-GlcPPase)的基因的分子克隆。在大肠杆菌中进行外源表达后，对重组酶进行了结构和功能鉴定。
高度纯化的EgrUDP-GlcPPase表现出单体结构，能够催化udp -葡萄糖的合成，Vmax为3350 U.mg−1。葡萄糖- 1p和UTP是**底物，但酶也使用(催化效率较低)TTP、半乳糖- 1p和甘露糖- 1p。
过氧化氢的氧化使酶失活，这种作用被二硫苏糖醇或硫氧还蛋白的还原逆转。由于在蛋白质的三维结构中，7个半胱氨酸残基的距离不够近，无法形成二硫键，因此氧化还原过程中会产生硫酸。
电泳研究表明，在氧化后，该酶排列在许多酶不活跃的结构构象;它们也在体内被检测到。最后，共聚焦荧光显微镜为胞质(主要在鞭毛)酶的定位提供了证据。
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