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SOSG检测溶液和植物组织中的单线态氧

作者: 发布时间:2022-08-08 09:52:49 次浏览

SOSG证实能用来检测溶液和植物组织中的单线态氧(1O2)。   活性氧引起的许多生理损伤都可能归因于单线态氧(1O2),包括与脱氧鸟苷选择性反应形成8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的核酸修饰。单线态氧的寿命足够长(水中有4.4μs)使其能够充分扩散进入细胞和组织。单线态氧通过在1270nm处具弱化学发光的**特征直接被检测。实验室中通常用三种之一的方法来生成单线态氧:   ①使用感光染料对二氧(3O2)进行光化学反应来制备;   ②通过对一种过氧化物或二氧环丁烷进行加热分解制备;   ③氧气流内通过微波放电来制备。   SOSG高度选择性结合单线态氧(1O2)。不像其他的荧光和化学发光的单线态氧检测试剂,SOSG与其他活性氧物质(ROS),包括羟基自由基(·OH)、超氧阴离子(·O2–)和一氧化氮(NO)无可见反应【见图1】。   A)用荧光光度计(Ex/Em= 488/525nm)测定溶液内的荧光,溶液内含SOSG(1μM)和亚甲基蓝(10μM)溶于100mMpH 7.5 Tris Buffer;单线态氧清除剂叠氮钠(NaN3,1 mM);或50%D2O(重水,能够延长1O2的寿命)。每20s完成一次荧光测定,每次测定间隔30s(如灰条标示)。在这30s的间隔中,样本暴露于激光辐射(630–680 nm,<5 mW),导致亚甲基蓝光敏生成1O2。   B)用荧光光度计(Ex/Em=488/525nm)测定溶液内的荧光,溶液为50mM pH 7 Tris buffer,1mM黄嘌呤,SOSG(1μM),或含SOSG(1μM),或含二氢罗丹明123。约20s之后,加入50 mU/mL黄嘌呤氧化酶(XO)。XO催化黄嘌呤的氧化,产生尿酸和超氧化物。超氧化物瞬间被H2O2降解。   荧光特征:   SOSG与单线态氧(1O2)反应前,探针最初发弱蓝色荧光,激发峰在372nm和393nm,发射峰在395nm和416nm。当含单线态氧(1O2),探针发射绿色荧光,光谱特征类似于荧光素(**激发/发射波长约504/525nm)。   线性化关系:   SOSG的荧光产物在某些溶液中随着时间被降解,且在不含单线态氧的碱性pH溶液中,SOSG会发荧光。不过,当进行适当的操作,绿色荧光信号的强度与单线态氧(1O2)含量相关,且不会受其他ROS的明显干扰。   使用方法:   1.SOSG储存液制备:收到货按照≤-20℃避光干燥保存。用甲醇来制备储存液,每100μg粉末加入33μL甲醇制备~5mM储存液。正式实验前制备工作液,不能用完的工作液需丢弃,不可保存后再用。   2.溶液检测:SOSG不具细胞膜渗透性,设计用来检测溶液环境内的单线态氧。**的稀释缓冲液和工作浓度需根据经验来调整。建议起始工作浓度为1-10μM。   保存:-20℃避光干燥保存,**期至少6个月 成立于2015年7月,是一家从事材料科学,**化学,生命科学的科研试剂公司。2015年发展至今,公司经营产品种类多达上百种,销售产品十几万个,公司一直致力于为科研客户提供优质的产品服务,广泛的产品种类,有价格竞争力的科研试剂。 提供SOSG单线态氧荧光探针及相关产品: 产品名称 规格 FITC-Dextran MW:20K  50mg PLGA45000-PEG5000-FITC  10mg FITC-Dextran MW:10K  50mg FITC-Dextran MW:20K  50mg FITC-Dextran MW:100K  50mg FITC-Dextran MW:200K  50mg FITC-Dextran MW:500K  50mg FITC-Dextran MW:2000K  50mg FITC-HRP  1mg FITC-HRP  1mg 松香-FITC   100mg FITC-dextran MW:1000K  10mg FITC-Avidin  1mg(2.5mg/ml) Fitc-青藤碱  1mg Ovalbumin-FITC  1mg FITC-仑伐替尼  1mg PCL5K-PEG2K-FITC  1mg LA-PEG3.4K-FITC  1mg mPEG550-FITC  1mg FITC-HA MW:50K  1mg FITC-HA MW:500K  1mg PEG2K-PLLA1.3K-FITC  1mg PAA190-FITC  1mg fitc-苯硼酸  1mg FITC-介孔二氧化硅20-30nm 5mg/ml  1ml FITC-Human fibrinogen 绿色荧光素标记人血纤维蛋白原  1mg DOX-FITC  1mg
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